جلوگيري از تقلبات قصابي ها با روش PCR
جلوگیری از تقلبات قصابی ها با استفاده از تكنیك تعیین جنسیت لاشه گاو با استفاده از PCR
چكیده:
از جمله عمده ترین مسائل جهانی در ارتباط با بازاریابی، فروش و صادرات گوشت، همانا كیفیت گوشت تولیدی و مطابق با ذائقه های مختلف مصرف كننندگان می باشد. در قرن اخیر، صنعت پرورش و تولید حیوانات گوشتی به سوی تولید گوشت بدون چربی، تولید بیشتر و نتیجناً افزایش گوشتهای مطبوع و حاوی تردی كافی حركت می كند. گوشت حیوان نر از ارزش اقتصادی بالاتری نسبت به حیوان ماده برخوردار است چرا كه حیوانات ماده عمدتا به منظور تولید مثل نگهداری می شود و طبیعاً ذبح آنها زمانی صورت می پذیرد كه به سن پیری رسیده باشند. موضوع پژوهش زیر استفاده از تكنیك تعیین جنسیت قطعات گوشت عرضه شده در قصابی ها و بررسی صحت و سقم ادعای آن نسبت به فروش گوشت حیوان نر به مشتری می باشد. نمونه های قطعات گوشت از 10 مغازه قصابی در سطح استان (سه نمونه از هر مغازه) به طور تصادفی اخذ گردیده و استخراج DNA به کمک روش Boom (1989) و واكنش زنجیره پلی مراز (PCR) در ابتدا برای تكثیر قطعه ای از ژن لپتین (كنترل) و سپس جهت تكثیر قطعه 307 جفت بازی از ناحیه ای از كروموزوم Y به نام لوكوس BRY1 گاوی انجام گرفت. نتایج حاصل از بررسی نشان داد كه در بیشتر موارد عرضه كنندگان گوشت از صداقت لازم با مشتری برخوردار نبوده و از فروش گوشت حیوان جوان و نر شانه خالی می كنند.
كلمات كلیدی: تعیین جنسیت لاشه، كیفیت گوشت، تقلب در فروش
مقدمه:
از جمله عمده ترین مسائل جهانی در ارتباط با بازاریابی، فروش و صادرات گوشت، همانا كیفیت گوشت تولیدی و مطابق با ذائقه های مختلف مصرف كننندگان، می باشد. در قرن اخیر، صنعت پرورش و تولید حیوانات گوشتی به سوی تولید گوشت بدون چربی، تولید بیشتر و نتیجتاً افزایش گوشتهای مطبوع و حاوی تردی كافی، حركت می كند. امروز توجه به تردی گوشت(Meat tenderness) از مواردی است كه همواره شركتهای تجاری جهانی را در یافتن راهكارهای مناسب در جهت ارتقا كیفیت این پارامتر، به رقابت واداشته است. از مشكلات كنونی در این رابط، فقدان روش طبقه بندی صحیح لاشه، بر اساس تردی نهایی گوشت می باشد. روشهای پیشنهادی اخیر نظیر سیستم طبقه بندی USDA به میزان كافی در پیش بینی تردی گوشت كارآئی ندارند و بنابراین نیاز به روشهایی جدید كه بتواند گوشت را از لحاظ تردی رتبه بندی نمایند، همواره احساس شده است. بكارگیری روشهای ابداعی جدید در كنار روشهای سنتی قبلی و معمول رتبه بندی گوشت، قطعا در بهبود كیفیت و تردی گوشت موثر واقع خواهند گردید. از جمله پارامترهایی كه قبل از ذبح دامهای اهلی، بر تردی و كیفیت گوشت موثر می باشد، می توان به تغدیه، استرس، ژنتیك، جنس، مدیریت اشاره كرد و از جمله فاكتورهایی كه پس از ذبح حیوان با تردی و كیفیت گوشت نهایی مرتبط هستند، می توان زمان پیری پس از جمود نعشی، تحریك پذیری الكتریكی ماهیچه، pH ، لرزش ماهیچه در موقع ذبح، مقدار رگ وپی، دفعات انجماد و ذوب گوشت و بالاخره روشهای پخت گوشت را نام برد. در تهیه خوراك كباب كه مطلوب ذائقه هر ایرانی است كیفیت گوشت خریداری شده از اهمیت عمده ای برخوردار است. معمولا گوشت دام نر از ارزش اقتصادی بالاتری نسبت به دام ماده برخوردار است چرا كه دام ماده به منظور تولید مثل پرورش داده می شود و طبیعتا ذبح آن در 7 الی 8 سالگی صورت می پذیرد یعنی زمانی كه ضخامت فیبرهای ماهیچه ای افزایش یافته و سطح كلاژن بالایی را برخورد دار می باشد. موضوع مطالعه فوق استفاده از تكنیك ساده برای تعیین جنسیت قطعات گوشت عرضه شده در قصابیها و ارزیابی صحت و سقم فروشنده مبنی بر نر جنس حیوان ذبح شده می باشد.
مواد و روشها:
نمونه گیری
تعداد 30 قطعه گوشت متعلق به ده مغازه عرضه گوشت در سطح استان بطور تصادفی انتخاب و اقدام به بیوپسی گردید. نمونه ها در فلاسك حاوی یخ در همان روز به آزمایشگاه انتقال داده شد و كاملا و به طور مجزا چرخ گردید و سپس با استفاده از ازت مایع پودر شد و 200 میلی گرم از هر نمونه توزین و به داخل تیوپ اپندروف منتقل و پس از شمارگذاری آماده استخراج شد.
استخراج DNA: استخراج DNA از نمونه ها با استفاده از روشBoom و همکاران (1989) با استفاده از کیت Diatom انجام گرفت. این روش مبتنی براستفاده از ماده لیز کننده گوانیدین تیوسیانات و جذب کننده سیلیکاژل می باشد. بدین منظور ابتدا 200 میکرولیتر از خون برداشته سپس 500 میكرولیتر بافر هضم كننده (M5 گوانیدین تیوسیانات،mM 20EDTA،mM40 Tris،40 گرم TritonX100، 10 گرم DTT ) به نمونه اضافه شده، نمونه ها به مدت 5 دقیقه در بن ما ری حاوی 65 درجه سانتیگراد انکوبه گردیدند. سپس 20 میكرولیتر محلول نوكلئاز (4 گرم ذرات سیلیكا،100 میكرولیترگوانیدین) اضافه شد و به مدت 10 دقیقه به آرامی ورتكس گردید. سپس به محیط همگن شده، 400 میكرو لیتر بافرسالین( EDTA 20mM , Tris-HCl 10mM , KCl 1M , NaCl 1M )اضافه و در نهایت از طریق ماده Extra Gene (10% رزین 02/0 % ماده رنگی OrangG، 01 /0 درصدTriton X 100 )، DNA زرد رنگ از سایر ناخالصیها جدا گردید. جهت تعیین غلظت نمونه های استخراج DNA شده، از روش الکتروفورز مقایسه ای آگارز با استفاده از مقادیر مشخصی DNA فاژ لامبدا و الکتروفورز استفاده گردید.
انتخاب آغازگرها: آغازگرهای این مقاله توسط از تحقیق Matthew و همكاران (1990) انتخاب و آغازگرها دوجفت27 نوکلئوتیدی بودند كه قطعه ای بطول 307 جفت باز از ناحیه Male specific region به نام لوكوس BRY1 گاوی را تكثیر می نمایند. این قطعه در فرد گاو نر قابل تكثیر و در فرد ماده وجود ندارد.
چكیده:
از جمله عمده ترین مسائل جهانی در ارتباط با بازاریابی، فروش و صادرات گوشت، همانا كیفیت گوشت تولیدی و مطابق با ذائقه های مختلف مصرف كننندگان می باشد. در قرن اخیر، صنعت پرورش و تولید حیوانات گوشتی به سوی تولید گوشت بدون چربی، تولید بیشتر و نتیجناً افزایش گوشتهای مطبوع و حاوی تردی كافی حركت می كند. گوشت حیوان نر از ارزش اقتصادی بالاتری نسبت به حیوان ماده برخوردار است چرا كه حیوانات ماده عمدتا به منظور تولید مثل نگهداری می شود و طبیعاً ذبح آنها زمانی صورت می پذیرد كه به سن پیری رسیده باشند. موضوع پژوهش زیر استفاده از تكنیك تعیین جنسیت قطعات گوشت عرضه شده در قصابی ها و بررسی صحت و سقم ادعای آن نسبت به فروش گوشت حیوان نر به مشتری می باشد. نمونه های قطعات گوشت از 10 مغازه قصابی در سطح استان (سه نمونه از هر مغازه) به طور تصادفی اخذ گردیده و استخراج DNA به کمک روش Boom (1989) و واكنش زنجیره پلی مراز (PCR) در ابتدا برای تكثیر قطعه ای از ژن لپتین (كنترل) و سپس جهت تكثیر قطعه 307 جفت بازی از ناحیه ای از كروموزوم Y به نام لوكوس BRY1 گاوی انجام گرفت. نتایج حاصل از بررسی نشان داد كه در بیشتر موارد عرضه كنندگان گوشت از صداقت لازم با مشتری برخوردار نبوده و از فروش گوشت حیوان جوان و نر شانه خالی می كنند.
كلمات كلیدی: تعیین جنسیت لاشه، كیفیت گوشت، تقلب در فروش
مقدمه:
از جمله عمده ترین مسائل جهانی در ارتباط با بازاریابی، فروش و صادرات گوشت، همانا كیفیت گوشت تولیدی و مطابق با ذائقه های مختلف مصرف كننندگان، می باشد. در قرن اخیر، صنعت پرورش و تولید حیوانات گوشتی به سوی تولید گوشت بدون چربی، تولید بیشتر و نتیجتاً افزایش گوشتهای مطبوع و حاوی تردی كافی، حركت می كند. امروز توجه به تردی گوشت(Meat tenderness) از مواردی است كه همواره شركتهای تجاری جهانی را در یافتن راهكارهای مناسب در جهت ارتقا كیفیت این پارامتر، به رقابت واداشته است. از مشكلات كنونی در این رابط، فقدان روش طبقه بندی صحیح لاشه، بر اساس تردی نهایی گوشت می باشد. روشهای پیشنهادی اخیر نظیر سیستم طبقه بندی USDA به میزان كافی در پیش بینی تردی گوشت كارآئی ندارند و بنابراین نیاز به روشهایی جدید كه بتواند گوشت را از لحاظ تردی رتبه بندی نمایند، همواره احساس شده است. بكارگیری روشهای ابداعی جدید در كنار روشهای سنتی قبلی و معمول رتبه بندی گوشت، قطعا در بهبود كیفیت و تردی گوشت موثر واقع خواهند گردید. از جمله پارامترهایی كه قبل از ذبح دامهای اهلی، بر تردی و كیفیت گوشت موثر می باشد، می توان به تغدیه، استرس، ژنتیك، جنس، مدیریت اشاره كرد و از جمله فاكتورهایی كه پس از ذبح حیوان با تردی و كیفیت گوشت نهایی مرتبط هستند، می توان زمان پیری پس از جمود نعشی، تحریك پذیری الكتریكی ماهیچه، pH ، لرزش ماهیچه در موقع ذبح، مقدار رگ وپی، دفعات انجماد و ذوب گوشت و بالاخره روشهای پخت گوشت را نام برد. در تهیه خوراك كباب كه مطلوب ذائقه هر ایرانی است كیفیت گوشت خریداری شده از اهمیت عمده ای برخوردار است. معمولا گوشت دام نر از ارزش اقتصادی بالاتری نسبت به دام ماده برخوردار است چرا كه دام ماده به منظور تولید مثل پرورش داده می شود و طبیعتا ذبح آن در 7 الی 8 سالگی صورت می پذیرد یعنی زمانی كه ضخامت فیبرهای ماهیچه ای افزایش یافته و سطح كلاژن بالایی را برخورد دار می باشد. موضوع مطالعه فوق استفاده از تكنیك ساده برای تعیین جنسیت قطعات گوشت عرضه شده در قصابیها و ارزیابی صحت و سقم فروشنده مبنی بر نر جنس حیوان ذبح شده می باشد.
مواد و روشها:
نمونه گیری
تعداد 30 قطعه گوشت متعلق به ده مغازه عرضه گوشت در سطح استان بطور تصادفی انتخاب و اقدام به بیوپسی گردید. نمونه ها در فلاسك حاوی یخ در همان روز به آزمایشگاه انتقال داده شد و كاملا و به طور مجزا چرخ گردید و سپس با استفاده از ازت مایع پودر شد و 200 میلی گرم از هر نمونه توزین و به داخل تیوپ اپندروف منتقل و پس از شمارگذاری آماده استخراج شد.
استخراج DNA: استخراج DNA از نمونه ها با استفاده از روشBoom و همکاران (1989) با استفاده از کیت Diatom انجام گرفت. این روش مبتنی براستفاده از ماده لیز کننده گوانیدین تیوسیانات و جذب کننده سیلیکاژل می باشد. بدین منظور ابتدا 200 میکرولیتر از خون برداشته سپس 500 میكرولیتر بافر هضم كننده (M5 گوانیدین تیوسیانات،mM 20EDTA،mM40 Tris،40 گرم TritonX100، 10 گرم DTT ) به نمونه اضافه شده، نمونه ها به مدت 5 دقیقه در بن ما ری حاوی 65 درجه سانتیگراد انکوبه گردیدند. سپس 20 میكرولیتر محلول نوكلئاز (4 گرم ذرات سیلیكا،100 میكرولیترگوانیدین) اضافه شد و به مدت 10 دقیقه به آرامی ورتكس گردید. سپس به محیط همگن شده، 400 میكرو لیتر بافرسالین( EDTA 20mM , Tris-HCl 10mM , KCl 1M , NaCl 1M )اضافه و در نهایت از طریق ماده Extra Gene (10% رزین 02/0 % ماده رنگی OrangG، 01 /0 درصدTriton X 100 )، DNA زرد رنگ از سایر ناخالصیها جدا گردید. جهت تعیین غلظت نمونه های استخراج DNA شده، از روش الکتروفورز مقایسه ای آگارز با استفاده از مقادیر مشخصی DNA فاژ لامبدا و الکتروفورز استفاده گردید.
انتخاب آغازگرها: آغازگرهای این مقاله توسط از تحقیق Matthew و همكاران (1990) انتخاب و آغازگرها دوجفت27 نوکلئوتیدی بودند كه قطعه ای بطول 307 جفت باز از ناحیه Male specific region به نام لوكوس BRY1 گاوی را تكثیر می نمایند. این قطعه در فرد گاو نر قابل تكثیر و در فرد ماده وجود ندارد.
آرش جوانمرد
+ نوشته شده در ساعت توسط MMD bostani
|